A La Talpa partecipano un gruppo di VIP, che diventano i concorrenti del reality ma anche i sospettati e gli indagati. L’obiettivo finale del gioco è quello di smascherare chi tra i partecipanti è la talpa ovvero chi sta sabotando tutti. A votare sono sia il pubblico sia gli stessi concorrenti del gioco. Chi ha ricevuto più nomination va in sfida e deve superare un test di eliminazione, un vero e proprio interrogatorio, in cui viene sottoposto a 10 domande dirette sull’identità e sulle azioni della talpa. Lo scopo è rispondere a più domande correttamente per rimanere in gara.
La conduzione del programma è stata affidata ad Amanda Lear nella prima puntata della prima stagione. Dalla seconda puntata della prima stagione all’ultima della terza, conduttrice del reality è stata Paola Perego. Nella quarta edizione, del 2024, il timone passa a Diletta Leotta. Nelle prime tre edizioni erano previsti degli inviati, ovvero degli accompagnatori che accoglievano i concorrenti al loro ingresso nel reality e che li accompagnavano al momento della loro eliminazione. Nella prima stagione l’accompagnatore è stato Guido Bagatta, nella seconda Stefano Bettarini mentre nella terza Paola Barale. Nella quarta stagione non è stata prevista questa figura.
Le location del reality sono state: